膠原蛋白海綿與明膠海綿都是海綿狀的材料,但是它們的構(gòu)成是完全不同的材料,膠原蛋白是屬于結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì),在體內(nèi)以膠原纖維的形式存在,從新鮮的牛跟腱提取,保持三股螺旋結(jié)構(gòu),相對分子質(zhì)量為30萬,形成的膜具有較好的柔韌性、彈性和強度,在模擬生理條件下能再形成纖維,能明顯激活細胞的生長。有很好的生物活性及組織修復功能;明膠多提取自皮革,三股螺旋結(jié)構(gòu)已被破壞,相對分子質(zhì)量分布較寬,從幾萬到10萬,且不具備生物活性且材料來源不可控,很易有重金屬殘留,而導致創(chuàng)面感染。
一、從制備工藝來說:
1、相對分子質(zhì)量的對比
從下圖所示的電泳分析圖譜可以看出:膠原的相對分子質(zhì)量更大,膠原的電泳圖有3條泳帶,在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈,在200kD附近出現(xiàn)的1條泳帶是膠原分子的β鏈。即膠原的每條多肽鏈相對分子質(zhì)量為10萬,3條多肽鏈構(gòu)成一個膠原分子,1個膠原分子相對分子質(zhì)量為30萬;明膠的電泳分離帶為一個連續(xù)帶,相對分子質(zhì)量主要分布在幾萬到10萬;水解膠原蛋白也是一個連續(xù)分離帶,但其相對分子質(zhì)量比明膠小,主要分布在幾千到3萬。
2、成膜性能對比
實驗發(fā)現(xiàn):水解膠原蛋白不能成膜,而膠原和明膠可以成膜。用掃描電子顯微鏡觀察到的膠原膜和明膠膜的微觀結(jié)構(gòu),如圖2所示
從圖2(a)可以看出,膠原成膜后仍保持網(wǎng)狀纖維結(jié)構(gòu),而圖2(b)顯示出明膠膜已不具有纖維結(jié)構(gòu)特征,電子顯微鏡觀察到的只是一個平滑表面。此外,實驗中發(fā)現(xiàn)明膠膜性脆、無韌性,易破碎;而膠原膜具有一定的柔韌性、延伸性,強度較好。實驗測得明膠膜和膠原膜的抗張強度分別為(36±4)N/mm2,(58±5)N/mm2,斷裂伸長率分別為(3.0±0.5)%和(7.0±0.5)%。
3、再纖維性的對比
將膠原、明膠和水解膠原蛋白在模擬生理條件(與動物體內(nèi)相似的溫度和中性鹽含量)下放置25min,期間不斷觀察其吸光度的變化,得到它們的纖維形成曲線,如圖3所示
從圖3可以看出,在實驗條件下膠原溶液吸光度在短時間內(nèi)即快速增大,然后到達一個相對穩(wěn)定的平臺。而明膠和水解膠原蛋白在實驗的整個過程中吸光度都基本保持不變。這是由于膠原溶液在生理條件下,膠原分子之間能再度相互連接形成纖維,導致吸光度上升。由此說明:只有膠原溶液具有獨特的再纖維性質(zhì),而它的變性產(chǎn)物明膠和降解產(chǎn)物水解膠原蛋白則不具有這樣的性質(zhì)。
用掃描電子顯微鏡觀察膠原按照以上條件形成的膠原纖維的結(jié)構(gòu),如圖4所示。圖4表明,膠原的再纖維呈多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。這是因為膠原溶液中的膠原分子仍然保留其三股螺旋結(jié)構(gòu),所以在適當?shù)臈l件下,溶液中的膠原分子靠氫鍵或分子間作用力連接,再度以四分之一交錯排列的方式形成纖維束。而明膠和水解膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)都被破壞,而且這種破壞是不可逆的,因而喪失了再纖維性。所以,膠原、明膠和水解膠原蛋白中,只有膠原才具有再纖維的生物活性。這也決定了它們在應用上的不同。
4、細胞生物學性能對比
膠原和明膠以及水解膠原蛋白對細胞生長的影響也存在很大的區(qū)別[8~9]。采用角質(zhì)形成細胞分別在膠原、明膠和水解膠原蛋白底物上進行細胞培養(yǎng)時,培養(yǎng)10h后用顯微鏡觀察到的細胞生長繁殖情況如圖5所示。
膠原上培養(yǎng)的細胞的生長繁殖能力明顯優(yōu)于在明膠上的培養(yǎng)效果。
二、從醫(yī)生使用角度來說
因為制備工藝的原因,雖同為海綿狀,但兩者貼敷于創(chuàng)面,性狀有較大的區(qū)別:膠原柔軟而具有抗拉伸能力,既不膨脹也不收縮;而明膠質(zhì)感較硬,容易刺激創(chuàng)面,牽拉易碎,膨脹比較明顯。
三、從功效來區(qū)別
1、修復
膠原有三螺旋結(jié)構(gòu),有完整的生物活性,作為一個細胞支架性的材料,起到一個很好的修復的效果;明膠是由變性蛋白構(gòu)成,沒有生物活性,沒有修復的功效。
2、止血
膠原在吸收滲血的同時可激活內(nèi)源性止血,而明膠主要靠其多孔狀結(jié)構(gòu)吸收體液作用止血。
3、填充
明膠不能適于填充,因為它的降解周期小于7天,不能起到長期占位的效果;而膠原降解周期是4-8周,填充明顯好于明膠。
從以上幾點區(qū)別,膠原與明膠是兩個不同時代的產(chǎn)物,不可同日而語。